品牌:西安强化生物科技有限公司
产品储存:-20℃避光干燥
产品规格:1mg
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参数信息

试剂名称：ROSGreenTM H2O2 Probe 过氧化氢荧光探针

规格：1mg

纯度：≥95%

储存条件：-20℃避光干燥

生产厂商：西安强化生物科技

 

使用方法

1、储存液制备

将低温保存的产品从冰箱取出，置于室温回温至少20min。低速离心3-5min。之后往瓶内加入无水DMSO充分溶解配成2~5mM储存液。

（比如，1mg ROSGreenTM H2O2 Probe加入333μl DMSO，溶解混匀后即得到5mM储存液）。按照单次用量分装冻存，避免反复冻融，至少3个月稳定。

2、工作液准备

正式实验前，或取粉末按照【储存液制备】用DMSO溶解，或于室温融化一管DMSO储存液。

（1）对于溶液H2O2测定，按照2~20μM工作液浓度制备2×工作液，用20mM Hepes缓冲液或其他缓冲液（pH 7.0）稀释储存液。工作液现配现用。

建议使用5μM终浓度的ROSGreenTM H2O2 Probe，测定溶液体系中H2O2浓度。

（2）对于细胞H2O2测定，按照2~20μM工作液浓度制备1×工作液，用含20mM Hepes缓冲液的HBSS，pH 7.0 或PBS稀释储存液。工作液现配现用。

3、 上清液H2O2测定

【以下为溶液H2O2测定的步骤，用作参考，请根据具体需求做调整。】

（1）于96孔板，加50μl 2×ROSGreenTMH2O2Probe工作液到每个孔（H2O2标准、空白对照、待测样本）内使总的测定体积为100μl/孔。

（2）室温避光孵育反应体系15~60min。

（3）荧光酶标板内监测用荧光增强，Ex/Em=490/525nm。

（4）空白孔（只含有反应缓冲液）的荧光用作对照，其他孔的荧光值需减掉空白对照孔荧光。

 

注意事项

（1）本品的DMSO储存液需分装成单次用量后，-20ºC避光保存，避免反复冻融。所有工作液现配现用。

（2）整个操作过程中注意避光。

（3）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。