离心机
RNA提取试剂盒
2023-01-07 01:20  点击:1840
品牌:ECALBIO
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一、从组织中提取总RNA
 
1)液氮研磨,组织块直接放入研体中,加入少量液氮,迅速研磨,待组织变软,再加少量液氮,再研磨,如此三次,按50-100mg组织/mltrizol加入trizol,转移入离心管进行第2步操作。
2)匀浆:组织样品按50-100mg/mltrizol加入trizol,另外,组织体积不能超过trizol体积的10%,否则匀浆效果会不好,用电动匀浆器充分匀浆约需1-2分钟。
 
二、从细胞中提取总RNA
1)培养贴壁细胞:不须消化,可直接用trizol进行消化、裂解,trizol体积按10cm2/ml比例加入。
2)悬浮细胞可直接收集、裂解,每1ml trizol可裂解5×106动物、植物或酵母细胞,或107细菌细胞。
2.细胞或组织加trizol后,室温放置5min,使其充分裂解。注:此时可放入-70℃长期保持。
3.12000rpm离心5min,弃沉淀。
4.按200µl氯仿/ml trizol加入氯仿,振荡混匀15分钟,室温放置15min。注:禁用漩涡振荡器,以免基因组DNA断裂。
5.4℃ 12000g离心15min。
6.吸取上层水相,至另一离心管中。
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